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scienova高通量透析原理
点击次数:119 更新时间:2024-07-05
 

scienova高通量透析原理

 

透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开的技术,可以用于蛋白分离和蛋白纯化。自从透析法被发明以来,透析已经成为了生物化学实验经常使用的分离纯化技能之一,常和盐析、盐溶等方法联合使用。该分离量较小、时间长,在生物大分子的制备过程当中,除盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技能。然而将透析法用于蛋白纯化时,由于透析主要的目的是换液,而绝大部分蛋白都属于大分子,所以透析能起到的纯化效果是非常有限的。

XDB filling

 

1、什么是透析法

 

透析法是利用半透膜将蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、双糖等杂质分开,也可以将分子大小不同的蛋白质分开。半透膜的孔有大有小,可以根据待分离物质的分子质量来选择适当的半透膜。将待纯化的蛋白质溶液装在半透膜做成的透析袋内,放入透析液如蒸馏水或缓冲液,适时跟换透析液,直至透析袋内无机盐等小分子物质减少到最小值为止。美迪西提供蛋白表达纯化服务,可以为客户在蛋白表达纯化方面提供多种选择,包括从方案设计、基因优化、表达条件优化到纯化的技术体系,以提高客户的目的蛋白表达水平。

 

在蛋白分离和蛋白纯化过程中,透析只需要使用专用的半透膜便可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或者缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不停扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度到达平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液",袋(膜)外的溶液称为“渗出液"或者“透析液"。透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。

XDB ED300 in Liquid Handling Device_6

 

2、透析法分离盐

 

盐析法是在蛋白质溶液中加入一定浓度的中性盐,让蛋白质从溶液中沉淀析出的方法。蛋白质用盐析法沉淀分离后,需脱盐才能获得纯品,脱盐常用的方法为透析法。蛋白质在溶液中因其胶体质点直径较大,不能透过半透膜,而无机盐及其它低分子物质可以透过,故利用透析法可以把经盐析法所得的蛋白质提纯。

 

3、透析法去除小分子杂质

 

有研究者进行了对自提精制裙带菜粗多糖(UPPS)分离纯化及体外抗肿瘤活性研究[1]。方法是首先对裙带菜粗多糖进行Sevage法除蛋白、H2O2法脱色素、透析法除去小分子;然后运用DEAE-52、SephadexG-200柱层析对裙带菜多糖半纯品进一步纯化;最后采用MTT法测定了UPPS-B1对肿瘤细胞SGC-7901和HepG-2生长、增殖的抑制作用。结果发现裙带菜粗多糖通过脱蛋白、脱色、透析后运用DEAE-52、SephadexG-200柱层析进行分离纯化,得到一个组分UPPS-B1。其对SGC-7901和HepG-2均具有一定的抑制作用并具有剂量依赖性。因此UPPS-B1是均一度较好的多糖组分,具有抗肿瘤活性。

 

还有研究者考察了制备方式及制备条件等对素化高分子纳米粒子粒径大小的影响。方法是采用透析法制备素化两亲性共聚物纳米粒子,通过单因素实验对比纳米粒子粒径的大小。结果发现采用有机相滴加至水相的制备方法获得的粒径大小较适合用于药物载体,且初始有机溶剂加入量对粒径的影响较大。

 

而透析法作为一种蛋白分离、蛋白纯化方法,其纯化功能非常有限,应采用多种分离方法来,以便分离和纯化出生物学性质不变的蛋白质。

MD100

一、Scienova 产品介绍
1、实验室透析盒/透析器
   Xpress Dialyzer透析装置是小体积样品透析的即用型系统,膜透析过程采用简单易用的一次性透析管,样品数量1-96个样品之间选择。可以使用单个透析管也可用高通量筛选的96个样本系统。Xpress透析装置具有高通量处理样品、高样品回收率、样品处理温和、方便使用的特点。
   Scienova透析装置特别的几何结构、膜面积与样品体积的合适比例以及小的扩散路径,使得透析时间显著缩短。能够快速有效地纯化蛋白质、RNA和DNA样本,典型应用包括血浆蛋白结合率检测、经消化后蛋白质样品的纯化、合成蛋白质样品的纯化、以及药物相互作用和药物结合、药物开发及血清中游离激素的检测等。
   Scienova XDB透析器采用盒式即用型设计,可轻松使用实验室移液管进行处理,与微量微孔板、深孔板兼容,可用于大多数移液系统和实验室自动化系统,实现样品透析过程的自动化,特别适合于高通量筛选或筛查实验。Xpress透析器实现了小样品量、大量样本的安全有效前处理,性价比高。

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   Xpress Dialyzer 实验室透析装置包括系列产品,型号有 MD100、ED300、MD300、MD1000、XDR-1。产品采用低结合的再生纤维素膜,截留分子量(MWCO)为2, 3.5, 6-8, 20 kDa,温度 1-60°C,pH值 4-8。采用Bio-Xell ® 生物纤维素膜,截留分子量2, 3.5 ,6–8,12–14 ,20, 140 kDa,温度1-60°C,pH值5-8。

Xpress Dialyzer 实验室透析装置的优势:

   高样品通量,样品制备时间减少2至12倍

   高收率,回收率达98%

   采用微量微孔板,可用于液体处理系统

   使用标准移液枪加载和提取样品

   可高压灭菌

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2、实验室透析管
    GeBAflex 透析管专门用于少量样品的透析,小型透析管适用10-250μL 样品,中型透析管适用100-800μL样品,大型透析管适用0.1-3ml样品,超大型透析管适合10-20ml样品。产品由不含重金属和硫化物的高纯度再生纤维素制成的高质量膜制成,样品回收率高,达97%,易于使用实验室移液枪进行处理,可用于单个样品的透析、清洗、缓冲及浓缩,蛋白质与蛋白质,蛋白质DNA 及蛋白质RNA 等复合物形成研究,以及MALDI-MS分析的蛋白质样品前处理。

二、产品应用
Scienova透析装置可用于实验室透析的多个领域,包括:

    除盐、除溶剂,除洗涤剂

    复合物形成研究(蛋白质-蛋白质,蛋白质-DNA,蛋白质-RNA)

    样品、蛋白质提取物或者细胞提取物的pH和缓冲液的调节

    小氨基酸的肽透析

    病毒颗粒的纯化

    除去被污染的小分子

蛋白质透析、蛋白样品前处理等

 

通量微量需求的合适产品;

效率是同类产品的2-20倍;

样品回收率最高可达98%;

样品加取方便、即拿即用


 
联系方式
  • 86-411-87187730

    18804209403

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